Eenvoudige stappen voor het maken van natriumcitraatbuffer

Leer in zes eenvoudige stappen hoe u natriumcitraatbuffer maakt. Natriumcitraat of trisodiumcitraat kan bufferoplossingen in het pH-bereik van ongeveer 3 tot 6. 2. Citroenzuur kan het werk ook doen.

Natriumcitraatbuffer wordt gebruikt voor RNA-isolatie omdat het de basishydrolyse van de RNA-strengen minimaliseert. Dit maakt het een belangrijke stap in de mRNA-zuivering tijdens genomisch onderzoek of voor het bestuderen van transcriptie.

Citraatgebaseerde buffers kunnen ook de detectie van antigenen in vaste weefselspreparaten helpen omdat ze de kruisverbindingen tussen de antigenen en het fixatiemedium vormen.

Met de onderstaande gids maak je een natriumcitraatbuffer van pH 6. De instructies zijn niet alleen makkelijk maar ook snel uit te voeren. Het duurt ongeveer 10 minuten om deze stappen te voltooien.

Twee opties om de buffer te maken

Er zijn twee manieren om een ​​natriumcitraatbuffer te maken. Bepaal eerst of u zowel citroenzuur als de geconjugeerde base, natriumcitraat, heeft om mee te werken. Als u alleen citroenzuur hebt, is het geen probleem. U kunt de buffer nog steeds maken.

Aan de andere kant, als u zowel het zuur als de basis heeft, creëer u een voorraadoplossing van elk. Meng 21 gram citroenzuur in 1 liter gedestilleerd water en 29. 4 gram natriumcitraat in 1 liter gedestilleerd water.

Als u alleen citroenzuur hebt, meng dan 2 gram in minder dan 1 liter gedestilleerd water en ga verder naar de volgende stap.

Citroenzuur- en Natriumcitraatoplossingen mengen

Nu u uw voorraadoplossing hebt gemaakt (als u zowel een zuur als een basis had) of uw zuur in gedistilleerd water vermengd (als u dat niet gedaan hebt), kunt u focus op uw oplossingen.

Meng 82 milliliter van de citroenzuuroplossing met 18 milliliter van de natriumcitraatoplossing.

Maak vervolgens het totale volume van het mengsel tot net onder 1 liter met gedestilleerd water. Laat genoeg volume achter om de toevoeging van natriumhydroxide (NaOH) in de volgende stap toe te staan.

De pH aanpassen

Gebruik de 1M natriumhydroxide om de oplossing van het mengsel zacht te roeren om de pH van het mengsel op 6 te zetten. Vervolgens maakt u het uiteindelijke volume van de oplossing tot 1 liter met gedestilleerd water door gebruik te maken van een volumetrische fles.

Wat je nodig hebt om de buffer te maken

Niet alleen zal het je heel lang duren om de natriumcitraatbuffer te maken, maar ook daar hoeft u niet veel materiaal te hebben. Met citroenzuur, 1M natriumhydroxide, gedistilleerd water en een gekalibreerde pH-sonde komt u halfweg daar. Het gebruik van natriumcitraat is optioneel.

Het maken van de buffer vereist ook een 1 liter-cilinder, een 1 liter volumetrische fles en drie 1 liter-flessen. Ten slotte heb je een magnetische roerbar en een magnetische roerder nodig.

Als u niet al deze materialen heeft, overweeg dan het lab op uw school of werkplaats, zodat u ze zelf niet hoeft te kopen. U kunt deze materialen ook gemakkelijk online kopen of een speciaalwarenzaak bezoeken in uw omgeving.