Video: SPEED GANG - H O E (EXCLUSIVE) (LYRICS) 2024
PBS (fosfaat gebufferde zoutoplossing) is een veelgebruikte buffer voor immunohistochemische kleuring en wordt veelal gebruikt bij biologisch onderzoek. De osmolariteit en ionenconcentraties van de oplossingen passen bij die van het menselijk lichaam (isotonisch).
PBS is een op water gebaseerde zoutoplossing die natriumwaterstoffosfaat, natriumchloride en in sommige gevallen bevat kaliumchloride en kaliumdihydrogenfosfaat.
Immunofluorescente Staining voor IHC
Immunofluorescente kleuring was de eerste immunohistochemische (IHC) kleuring methode. Met de fundamentaliteit van antigeen-antilichaam bindende reactie worden antigenen zichtbaar met behulp van fluorescentie kleurstoffen wanneer geconjugeerd met antilichamen. Het proces gebeurt wanneer geactiveerd door spannend licht van een specifieke golflengte onder een fluorescerende microscoop. Immunohistochemie verwijst naar het proces van het detecteren van antigenen (bijv. Eiwitten) in de cellen van een weefsectie door het principe van antilichamen die specifiek binden tegen antigenen in biologische weefsels te gebruiken.
Gebruik van fosfaatbufferde zoutoplossing (PBS)
Fosfaatgebufferde zoutoplossing heeft veel toepassingen omdat het voor de meeste cellen isotonisch en niet giftig is. Het kan gebruikt worden om stoffen te verdunnen en wordt gebruikt voor het spoelen van containers die cellen bevatten. PBS kan gebruikt worden als verdunningsmiddel in methoden om biomoleculen te drogen, omdat watermoleculen binnen het om de substantie worden gestructureerd (bijvoorbeeld eiwit) worden gedroogd en geïmmobiliseerd op een vast oppervlak.
De dunne film van water dat aan de stof bindt, voorkomt denaturatie of andere conformatieve veranderingen. Carbonaatbuffers kunnen gebruikt worden voor hetzelfde doel maar met minder effectiviteit. PBS kan ook gebruikt worden om een referentiespectrum te nemen bij het meten van de eiwitadsorptie in ellipsometrie.
Bereiding van PBS
Er zijn veel verschillende manieren om PBS te bereiden.
Sommige formules bevatten geen kalium, terwijl andere calcium of magnesium bevatten. Het onderstaande bufferrecept, dat relatief makkelijk is, is voor 10X PBS voorraadoplossing (0. 1M). Er is ook een optie om Tween toe te voegen. Het hele proces duurt ongeveer 10 minuten.
Fosfaatbufferde zoutoplossing (PBS) maken
- Weeg het volgende: 10. 9 g watervrij natriumfosfaat dibasisch (Na2HPO4), 3. 2g waterfrit natriumfosfaat monobasisch (NaH2PO4) en 90g natriumchloride (NaCl).
- Los al het bovenstaande op in net onder 1 liter gedistilleerd water.
- Stel de pH op 7. 4.
- Maak de oplossing tot een eindvolume van 1L.
- (optioneel) Voor een oplossing die 0,5% Tween 20 bevat, voeg 5 ml Tween 20 toe aan de 1L oplossing.
- Verdun 10X voor gebruik en herhaal de pH indien nodig.
Tips voor het maken van PBS Buffer
- Opslag bij kamertemperatuur.
- Niet-watervrij reagentia kan worden gesubstitueerd, maar je moet de juiste massa van elk herberekenen om de toegevoegde watermoleculen op te nemen.
Wat u nodig hebt om PBS-buffer te maken
- Monobasisch natriumfosfaat (watervrij)
- Natriumfosfaatdibasisch (watervrij)
- Natriumchloride
- Schaal- en weegboten
- Magnetische roerder en roerbalk > pH-sonde, gekalibreerd en geschikte oplossingen voor het aanpassen van de pH
- 1L volumekolf
- Tween 20 (optioneel)